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微生物鑒定方法
編輯:       時(shí)間: 2012-03-30       http:// www.tools.pengdekai.cn

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目前常見(jiàn)的微生物鑒定原理有以下幾種:

1. 酸堿反應(yīng):細(xì)菌代謝碳水化合物,一般產(chǎn)生酸性物質(zhì);分解蛋白質(zhì)或氨基酸,則產(chǎn)生堿性物質(zhì),根據(jù)不同細(xì)菌的理化性質(zhì)不同,測(cè)定細(xì)菌的分解底物導(dǎo)致PH值變化而產(chǎn)生的不同顏色,來(lái)判斷菌種。

2. 酶譜分析:根據(jù)細(xì)菌生長(zhǎng)產(chǎn)生酶的特性,在測(cè)定底物中加入基質(zhì)。使其與細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中的酶結(jié)合成熒光物質(zhì),可以在較短的時(shí)間判定菌種。

3. 高壓液相色譜分析:用氣相色譜檢測(cè)細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的代謝產(chǎn)物(揮發(fā)和非揮發(fā)脂肪酸),結(jié)果與數(shù)據(jù)庫(kù)數(shù)據(jù)比較后,得出鑒定結(jié)果。

4. 代謝指紋法:其原理是根據(jù)細(xì)菌對(duì)碳源(或氮源)利用的差異來(lái)區(qū)別和鑒定細(xì)菌,不同的細(xì)菌會(huì)利用不同碳源(或氮源)進(jìn)入新陳代謝過(guò)程(稱(chēng)為呼吸),而對(duì)其他一些碳源(或氮源)則無(wú)法利用,將每種細(xì)菌能利用和不能利用的一系列碳源(或氮源)進(jìn)行排列組合,就構(gòu)成了該種細(xì)菌特定的代謝指紋,由于細(xì)菌在利用碳源進(jìn)行呼吸時(shí),會(huì)發(fā)生一系列的氧化-還原反應(yīng),產(chǎn)生電子,TTC(四唑紫,2,3,5-TriphenylTetrazoliumChloride)在呼收電子后,會(huì)由無(wú)色的氧化型轉(zhuǎn)變?yōu)樽仙倪原型,通過(guò)肉眼觀察或計(jì)算機(jī)控制的讀數(shù)儀,將反應(yīng)結(jié)果同數(shù)據(jù)庫(kù)中的指紋進(jìn)行比對(duì),從而得到細(xì)菌的鑒定結(jié)果。

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