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ELISA試劑盒間接法測抗體
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| 編輯：
ELISA試劑盒
時間：
2012-09-20
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ELISA試劑盒間接法測抗體
ELISA試劑盒間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用海袪記的抗抗體，抗人免疫球蛋白抗體，以檢測巳與固相杭原結(jié)合的受拾抗體，故稱為間接法、操作步驟如下：
1.將特異性抗原與固相栽體聯(lián)結(jié)，形成鬧相抗原。洗除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
2.加稀釋的受檢血清，保溫反應(yīng)。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，血清中的其他成份在洗滌過程由被洗去。
3.加酶標抗抗體�？捎妹笜丝谷薼g以檢測總抗體，一般多用酶標抗人igg檢測抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標抗抗體結(jié)合，從而間接地標記上酶。洗滌后，固相載體上的酶景與標本中受檢抗體的量正相關(guān)。
4.加底物顯色。
ELISA試劑盒的本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。ELISA試劑盒間接法的優(yōu)點是只要變換包被抗原，就可利用同一酶標抗抗體建立檢測相應(yīng)抗體的方法。
ELISA試劑盒間接法成功的關(guān)鍵在于抗原的純度。雖然有時用粗提杭原包被也能取得實際有效的結(jié)果，但應(yīng)盡可能予以純化，以提髙試驗的特異性。特別應(yīng)注憊除去能與一般健康人血清發(fā)生反應(yīng)的雜質(zhì)，例如以ecoli為工程菌的重組抗原，如其中含有ecoli成份，很可能與受過e.coli感染者血淸中的抗e.coli抗體發(fā)生反應(yīng)�？乖幸膊荒芎信c酶標抗人lg反應(yīng)的物質(zhì)，例如來自人血漿或人體組織的抗原，如不將其中的去除，試驗中也將發(fā)生假陽性反應(yīng)。另外如抗原中含有無關(guān)蛋白，也會因競爭吸附而影響包被效果。
文章來自：ELISA試劑盒 免疫組化筆Pap Pen http://www.tools.pengdekai.cn/
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