PeproTech公司的重組細(xì)胞因子產(chǎn)品經(jīng)過(guò)了十分嚴(yán)格的生產(chǎn)、純化及質(zhì)檢過(guò)程，保證其在投放市場(chǎng)之前，達(dá)到如下要求：
1. 真實(shí)性：重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過(guò)N末端氨基酸序列分析；必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜（MS）檢測(cè)其真實(shí)性。
2. 純度：應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度。
3. 生物活性：進(jìn)行相應(yīng)的體外（in vitro）或體內(nèi)（in vivo）活性檢測(cè)。
4. 蛋白含量：通過(guò)紫外光譜分析，SDS-PAGE電泳檢測(cè)；必要時(shí)應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。
5. 內(nèi)毒素：kinetic LAL法檢測(cè)內(nèi)毒素。
6. 微生物：重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過(guò)濾除菌處理。
產(chǎn)品隨附的說(shuō)明書(shū)上載有產(chǎn)品的各項(xiàng)相關(guān)信息。請(qǐng)仔細(xì)閱讀這些信息，了解其配制和貯存提示。如果在閱讀說(shuō)明書(shū)后仍需更多信息，請(qǐng)查看以下常見(jiàn)問(wèn)題解答，或致電我們的技術(shù)服務(wù)部門(mén)。
重組細(xì)胞因子的凍干狀態(tài)
與市場(chǎng)上已有的其他蛋白產(chǎn)品不同，PeproTech細(xì)胞因子不含carrier protein或其他添加物（如BSA、HAS、蔗糖等），而是以低鹽的形式做凍干處理，因此微量的細(xì)胞因子在凍干過(guò)程中會(huì)沉積于管內(nèi)，形成很薄或不可見(jiàn)的蛋白層。PeproTech的質(zhì)控過(guò)程確保每管裝有非常準(zhǔn)確量的蛋白產(chǎn)品。所以我們建議在收到試劑后，務(wù)必于開(kāi)蓋前先離心20-30秒，使可能附于管蓋或管壁的蛋白成分聚集于管低（此時(shí)能否見(jiàn)到白色沉淀均屬正�，F(xiàn)象）。
重組細(xì)胞因子活性單位（units）的換算
各公司在開(kāi)發(fā)出重組細(xì)胞因子并檢測(cè)其活性后，通常會(huì)以ED50（半數(shù)有效濃度）或units（活性單位）來(lái)標(biāo)識(shí)其細(xì)胞因子的生物活性。因此1mg細(xì)胞因子中所含的活性單位（units）可以理解為將1mg/ml細(xì)胞因子原液稀釋成ED50的稀釋倍數(shù)，
以下是二者的換算公式：
1x106
_______________ = specific activity (units/mg)
ED50(ng/ml)
重組細(xì)胞因子的穩(wěn)定性
除非產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上另有特別說(shuō)明，否則所有PeproTech蛋白產(chǎn)品都為凍干粉形式，在室溫下也能保持很好的穩(wěn)定性。但是，我們推薦凍干產(chǎn)品最好保存于-20℃。大多數(shù)凍干產(chǎn)品經(jīng)溶解和稀釋后，可短時(shí)間保存于4℃；若要進(jìn)行較長(zhǎng)時(shí)間保存，
我們建議稀釋到工作液濃度并加入一定的carrier protein（如0.1% BSA），然后分裝保存于-20℃。請(qǐng)注意每一次凍融過(guò)程都會(huì)造成蛋白的部分變性，應(yīng)避免反復(fù)凍融。
重組細(xì)胞因子的交叉活性
除了少數(shù)例外，大多數(shù)人類(lèi)細(xì)胞因子對(duì)小鼠細(xì)胞都有活性。許多小鼠細(xì)胞因子對(duì)人類(lèi)細(xì)胞也有活力表現(xiàn)，但是與相應(yīng)的人類(lèi)細(xì)胞因子相比比活力較低。一些人類(lèi)的細(xì)胞因子如IL-7在小鼠細(xì)胞中甚至表現(xiàn)出比相應(yīng)的小鼠細(xì)胞因子更高的比活力。
而干擾素、GM-CSF、IL-3 和IL-4 是物種特異性的，對(duì)于非人類(lèi)細(xì)胞幾乎沒(méi)有活性。相反，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (FGFs) 和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 (neurotrophins) 是高度保守的，在其它的動(dòng)物物種細(xì)胞中也能表現(xiàn)很好的活性。
．離心（Centrifuge）：高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒，或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。
2．溶解（Reconstitution）：用去離子水或其它緩沖液（根據(jù)說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行選擇）溶解至說(shuō)明書(shū)要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/ml)。溶解時(shí)不可振蕩，避免因化學(xué)鍵的斷裂造成蛋白失活，可加入適當(dāng)?shù)娜軇┹p搖并靜置一段時(shí)間，待細(xì)胞因子完全溶解后使用。
溶劑的選擇：
1）要求用去離子水溶解的產(chǎn)品，務(wù)必不可用鹽溶液，避免過(guò)高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出；
2) 要求用鹽溶液溶解的產(chǎn)品，請(qǐng)依照說(shuō)明書(shū)上的濃度，同樣也是為了避免過(guò)高的鹽濃度。
3．分裝和貯存（Aliquot and Storage）：蛋白溶解后可根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)一步稀釋成工作液，稀釋可用RPMI 1640、DMEM 或PBS 等溶液。工作液在4℃可保存1 周，如需長(zhǎng)期保存，最好在稀釋液中加入10%的FCS（小�；蛱ヅＱ澹┗�0.1 %的BSA（牛血清白蛋白）或5% HAS（人血清白蛋白）來(lái)穩(wěn)定蛋白，然后需分裝凍存于-20℃ （注意：不可凍存于-50℃以下）。分裝時(shí)每管中工作液的體積最好是一次實(shí)驗(yàn)的用量，以實(shí)現(xiàn)每次實(shí)驗(yàn)用完一支工作液，避免反復(fù)凍融引起蛋白活性的降低。
細(xì)胞因子量極微，所以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牟僮魇潜匦璧�，任何不適當(dāng)?shù)娜芙舛紩?huì)造成實(shí)驗(yàn)的失敗，造成大量的浪費(fèi)。請(qǐng)謹(jǐn)慎操作！
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