接近peprotech細(xì)胞因子所需儀器
1、流式上樣管及細(xì)胞培養(yǎng)皿或板
2、25%CO2，37℃孵箱
3、混勻振蕩器
4、離心機(jī)
5、加樣器、Tips
6、流式細(xì)胞儀
全血：使用肝素鈉抗凝的真空采血管采血，不易采用肝素鋰、EDTA和ACD抗凝劑，血樣在8小時(shí)內(nèi)分析，超過(guò)8小時(shí)會(huì)導(dǎo)致活性的損失，一般細(xì)胞因子陽(yáng)性細(xì)胞會(huì)減少5%。如不能在8小時(shí)之內(nèi)檢測(cè)，應(yīng)將真空采血管水平室溫放置。
自身血漿中外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)：使用肝素鈉抗凝的采血后，分離PBMCs，24小時(shí)內(nèi)分析。
組織培養(yǎng)基中的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)：用Ficoll分離PBMCs，將細(xì)胞重懸于含10%熱滅活胎牛血清(FBS)的RPMI－1640培養(yǎng)基中，調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度為2×106細(xì)胞/ml。
調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度2×106細(xì)胞/mL于新鮮培養(yǎng)基中。
冰凍全血與PBMCs：使用1×紅細(xì)胞裂解液處理活化的外周血或者PBMCs，用PBS漂洗，并用含1%的BSA及10%的DMSO的PBS重懸，－70℃凍存。溶化后細(xì)胞置于染色管中，加上2～3mL的洗液，離心5分鐘后，用破膜劑對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破膜和染色。
